Аминотрансферазы (трансаминазы) сыворотки
Норма (варьирует в зависимости отметода):
аспартатная трансаминаза (ACT)- 6-25 МЕ/л при 30C),аланиновая трансаминаза (АЛТ) – 3-26 МЕ/лпри 30° С.)
А. Предосторожности.Избегатьгемолиза, быстро отделять сыворотку отсгустка.
Б. Физиологическая основа.
Аспартатнаятрансаминаза (ACT),аланиновая трансаминаза (АЛТ) илактатдегидрогеназа – это внутриклеточныеферменты, участвующие в обменеаминокислот и углеводов. В высокойконцентрации содержатся в мышцах,печени, мозге. Повышение концентрацииэтих ферментов в крови свидетельствуето некрозе или поражении прежде всегоэтих тканей. В. Интерпретация.
1.
Повышениепоказателя имеет место при инфарктемиокарда (особенноACT);при остром инфекционном гепатите(АЛТ обычно повышена больше, чемACT);циррозе печени (ACTповышенабольше, чем АЛТ); при метастазах впечень или первичной опухоли печени.При поражении опухолевым процессомсерозных полостей уровень ферментовповышается в транссудатах.ACTповышается при мышечной дистрофии,дер-матомиозите и па-роксизмальноймиоглобинурии.
2. Снижениепоказателя имеет место при недостаточностипиридоксина (витамина В,), часто врезультате повторных процедургемодиализа; при почечной недостаточности,при беременности.
Аммиак крови
Норма (по методу Конвея): 10-110 мкг% вцельной крови (СИ 12-65 мкмоль/л).
А. Предосторожности.Не использоватьантикоагулянты, содержащие аммиак.В качестве антикоагулянтов следуетприменять оксалат калия, кальцийдвунатриевуюсоль ЭДТА и гепарин, свободный от аммиака.Определение должно проводитьсянемедленно после забора крови или втечение часа, если образец хранилсяна льду.
Б. Физиологическая основа.
Аммиакпоступает в кровь из двух основныхисточников: 1) большое количество аммиакаосвобождается в толстом кишечникепри разложении азотсодержащих веществгнилостными бактериями; 2) аммиаквыделяется в процессе белкового обмена.
Поступающий в воротную систему илив общий кровоток аммиак быстропревращается в печени в мочевину.Печеночная недостаточность можетприводить к повышению аммиака в крови,особенно если она сопровождаетсявысоким потреблением белка или кишечным
кровотечением.
В. Интерпретация.Аммиак повышаетсяв крови при печеночной недостаточностиили при шунти-ровании кровотока в печенивследствие портака-вального анастомоза,особенно нафоневысокого содержаниябелка в пище или при кишечном кровотечении.
БЕЛКИ СЫВОРОТКИ ИЛИ ПЛАЗМЫ (В ТОМЧИСЛЕ, ФИБРИНОГЕН)
Норма: см. “Интерпретация”
А. Предосторожности.Нельзяиспользовать сыворотку или плазмусо следами гемолиза. Поскольку фибриногенудаляется при свертывании крови,определение его в сыворотке невозможно.
Б. физиологическая основа.Концентрациябелка определяет коллоидно-осмотическоедавление плазмы. На концентрациюбелка в плазме влияют питание, функцияпочек и печени, ряд заболеваний(множественная миелома), метаболическиенарушения. Изменения в соотношениибелковых фракций могут свидетельствоватьоб определенных заболеваниях.
В. Интерпретация 1. Общий белок сыворотки.Норма: 6-8 г%. (СИ:
60—80г/л). См.ниже”Альбумин и фракции глобулинов” итабл. 4.
Таблица 4. Фракции белков,определяемые при электрофорезе
% от общего белка | |
Альбумин | 52-68 |
&1-глобулин | 2,4-4,4 |
&2- глобулин | 6,1-10,1 |
B-глобулин | 8,5-14,5 |
гамма-глобулин | 10-21 |
2.Альбумин сыворотки илиплазмы. Норма:
3,5-5,5 г%(СИ: 33-55г/л):
а) повышениепоказателя имеет местопри дегидратации, шоке, гемоконцентрации,внутривенном введении больших количествконцентрированных “растворов”альбумина;
б) снижениепоказателя имеет местопри недоедании, синдроме малабсорбции,остром и хроническом гломерулонефрите,нефрозе, острой и хроническойпеченочной недостаточности, опухолях,лейкозах.
3. Глобулинсывороткиили плазмы. Норма: 2—3,6 г% (СИ: 20-36 г/л) (см.табл. 5 и б):
а) повышениепоказателя имеет местопри болезнях печени, инфекционномгепатите, циррозе печени, билиарномциррозе, гемохроматозе, системнойкрасной волчанке, плазмоклеточноймиеломе, лимфопролиферативныхзаболеваниях, саркоидозе, острых ихронических инфекциях; особенно прилимфогранулеме, обусловленной венерическимзаболеванием, тифе, лейшманиозе,шистоматозе, малярии;
б) снижениепоказателя имеет местопри недостаточно калорийном питании,врожденной агаммагло-булинемии,приобретенной гипогаммаглобулинемии,лимфолейкозе.
4. фибриногенплазмы. Норма: 0,2-0,6 г%(СИ:2-6г/л:
а)повышение показателя имеет местопри гломерулонефрите, нефрозе (иногда),инфекциях;
б) снижениепоказателя имеет местопри диссеминированном внутрисосудистомсвертывании крови (случаи беременностис отслойкой плаценты, эмболииоколоплодными водами, стремительныероды), при менингококковом менингите,раке простаты с метастазами, лейкозах,при острой и хронической печеночнойнедостаточности, врожденнойфибрино-генопении.
БИКАРБОНАТЫ СЫВОРОТКИ ИЛИ ПЛАЗМЫ
Норма: 24-28 мэкв/л (СИ: 24-28 ммоль/л)2).
А. Предосторожности.Плазма илисыворотка должны быть отделены отклеток крови и храниться в замороженномсостоянии в закрытых пробирках.
Б. Физиологическая основа.
Бикарбонатныйбуфер – одна из важнейших систем,обеспечивающих нормальный рН жидкостейтела. Определение бикарбонатов и рНв артериальной крови – главные показателипри оценке кислотно-щелочного баланса.
В. Интерпретация
I.Повышение показателяимеет место при а) метаболическомалкалозе (рН артериальной крови повышен),обусловленном приемом больших количествбикарбоната натрия, упорной рвотой свыбросом кислого содержимого желудка,а также дефицитом калия;
б) дыхательном ацидозе (рН артериальнойкрови снижен) вследствие неадекватноговыведения СО, (приводящего к повышениюРсо2 ) при эмфиземе легких, уменьшениидиффузии при поражении альвеолярноймембраны, при сердечной недостаточности,сопровождающей легочным застоем илиотеком легких, при нарушении вентиляциилегких любой этиологии, включаяпередозировку седатив-ных препаратов,наркотиков, или при неадекватнойискусственной вентиляции легких.
2. Снижениепоказателя имеет местопри
а) метаболическомацидозе (рНартериальной крови снижен) вследствиедиабетического кетоаци-доза, молочнокислогоацидоза, голодания, упорного поноса,почечной недостаточности, интоксикациисалицилатами;
б)респираторном алкалозе (рНартериальной крови повышен) вследствиегипервентиляции (снижено Рсо2).
БИЛИРУБИН СЫВОРОТКИ
Норма: общий 0,2-1,2 мг% (СИ: 3,5-19 мкмоль/л).Прямой (глюкуронид) – 0,1-0,5 мг%. Непрямой(несвязанный) – 0,1-0,7 мг% (СИ: прямой до7 мкмоль/л, непрямой до 12 мкмоль/л).
А. Предосторожности.Необходимобрать кровь натощак во избежаниемутности сыворотки. Для стабильностисыворотки ее образцы должны хранитьсяв замороженном виде в темноте.
Б. Физиологическая основа.
Прираспаде гемоглобина образуетсябилирубин. В печени он связываетсяс глюкуронатом и в виде диглюкуронидаэкс-кретируется с желчью. Билирубиннакапливается в плазме при печеночнойнедостаточности, закупорке желчевыводящихпутей, при повышенном распаде гемоглобина.Изменение концентрации может бытьсвязано также с дефектом ферментныхсистем,
участвующих в метаболизме билирубина(например, при отсутствииглюкуронилтрансферазы).
В. Интерпретация.
1.
Прямой инепрямойбилирубин сыворотки повышены приостром или хроническом гепатите,закупорке желчевыводящих путей (науровне желчных протоков или общегожелчного протока), при токсическойреакции на многие лекарственныепрепараты, химические вещества, токсины,при синдромах Дабин-Джонсона и Ротора.
2. Непрямойбилирубинсыворотки повышен при гемолитическиханемиях, других гемолитических реакциях,при отсутствии или дефицитеглюкуронилтрансферазы (например,при синдромах Жиль-бера и Криглера-Наджара).
3. Прямой иобщийбилирубин могут быть значительноповышены у здоровых людей после 24-48 чголодания (иногда даже после 12 ч), придлительной низкокалорийной диете.
7-ГЛУТАМИЛТРАНСПЕПТИДАЗА, ИЛИТРАНСФЕРАЗА, СЫВОРОТКИ
Норма: мужчины – менее 30 мЕД/мл при 30 °С, женщины
Источник: https://studfile.net/preview/535501/page:2/
Что показывают трансаминазы крови
Трансаминазы – это белковые молекулы, переносящие азот и водород. Они осуществляют связь между углеводным и белковым обменом. В норме находятся внутри клетки. Повышенный уровень трансаминаз в крови отражает разрушение тканей: сердечной, печени, поджелудочной железы и почек.
Подробнее о показаниях к исследованию, причинах возрастания уровня АСТ и АЛТ, а так же как можно при помощи их соотношения выявить болезни печени или инфаркт, читайте в этой статье.
Когда необходимо определение трансаминаз у взрослых и детей
Аминотрансферазы (трансаминазы, АЛТ и АСТ) в организме отвечают за целостность клеток.
Если происходит повреждение тканей, то они выходят в кровь, что дает возможность исследовать их активность. Самая большая концентрация этих ферментов обнаруживается в печени.
Поэтому большинство показаний связано с подозрениями на нарушение ее функции: слабость, пожелтение кожи, изменение цвета мочи и кала.
Проведение анализа необходимо при заболеваниях печени иммунного, инфекционного или токсического происхождения, приеме препаратов с негативным влиянием на печень, алкоголя. Его рекомендуют донорам и людям, которые отнесены к группам риска:
- были в контакте с больным вирусным гепатитом;
- имеют генетическую предрасположенность к печеночной патологии;
- болеют сахарный диабетом;
- страдают ожирением.
Исследование трансаминаз используется в процессе лечения пациентов с опухолевыми заболеваниями внутренних органов, циррозом и раком, жировым перерождением печени. Результаты диагностики могут быть использованы в комплексе с другими лабораторными тестами и для обследования пациентов с сердечной, мышечной болью, нарушением ритма сердца, отеками, одышкой, острой болью в животе.
аминотрансфераз в крови не может применяться для оценки степени тяжести болезни, так как их активность не связана с глубиной и обширностью разрушения тканей. Исследование АСТ и АЛТ обычно проводится вместе с анализами крови на билирубин, щелочную фосфатазу, креатинфосфокиназу, миоглобин, гаммаглутаминтрансфераза и лактатдегидрогеназу.
В детской практике изменения АЛТ и АСТ обычно связаны с инфицированием вирусом гепатита и медикаментозным поражением печени. Одно из опасных состояний – синдром Рея. Он возникает при лечении вирусных заболеваний аспирином и проявляется острой печеночной недостаточностью, энцефалопатией.
Рекомендуем прочитать статью о тромбоцитопении. Из нее вы узнаете о причинах появления и симптомах заболевания у взрослых и детей, диагностике состояния, лечении и последствиях для больного.
А здесь подробнее о тимоловой пробе.
Подготовка к анализу
Для исследования нужно взять кровь из вены, капиллярная кровь используется редко. Диагностика происходит строго натощак в утреннее время. В исключительных случаях врач может назначить анализ днем, после четырехчасового перерыва в приеме пищи. При плановом обследовании обязательно проводится предварительная подготовка:
- за 3 — 5 дней требуется отменить ряд медикаментов, которые могут изменить результаты анализа крови. Для этого врач вносит коррективы в терапию или при невозможности отмены в лабораторию больной предоставляет список препаратов, принятых накануне;
- за сутки из рациона нужно исключить жирную и острую пищу, алкоголь;
- последний прием пищи вечером до анализа должен быть легким;
- воздерживаться от еды надо не менее 8 и не больше 12 часов, в это время разрешена только питьевая вода;
- за полчаса до исследования крови не рекомендуются физические или эмоциональные нагрузки, запрещается курение.
Анализ крови из вены
Норма трансаминаз в сыворотке крови
Уровень ферментов измеряется в единицах на литр. Показатели нормы меняются с возрастом, отличаются по половому признаку. В период беременности бывает небольшое снижение АЛТ.
Нужно учитывать, что существует несколько методик измерения концентрации трансфераз в сыворотке крови, поэтому референсные (средние физиологические) значения для каждой лаборатории разные. По этой же причине, если больному рекомендуется повторное исследование, то его лучше проходить в том же учреждении, что и первичное.
Нормы аланиновой и аспарагиновой трансферазы (метод УФ кинетического теста)
Не всегда требуется знать только абсолютные значения этих показателей. Итальянский ученый Фернандо де Ритис предложил использовать коэффициент для диагностики болезней, который назвали в его честь. Он применим только при обнаружении повышенных значений.
Если соотношение АСТ/АЛТ меньше одного, то это признак вирусного гепатита, а при превышении единицы – хронических и дистрофических поражений печеночной ткани. У алкоголиков он больше 2.
Смотрите на видео об анализе крови АЛТ и АСТ:
Почему уровень показателей может быть повышен
Активность АЛТ и АСТ является маркером повреждения печени, а также дополнительным показателем при диагностике инфаркта.
При трактовке результатов анализа учитывают отклонения от нормы не только показателей трансфераз, но и других печеночных проб, данные врачебного обследования и методов инструментальной диагностики. Все причины изменений можно разделить на несколько групп.
Разрушены клетки печени
Некроз гепатоцитов – это необратимое повреждение ткани, при котором отмечается самое большое повышение активности ферментов. Его причинами может быть вирусное, токсическое, медикаментозное или алкогольное разрушение клеток, аутоиммунные воспалительные процессы, а также острая ишемия при нарушении притока крови к органу.
Застой желчи
Внутрипеченочный холестаз приводит к тому, что образующаяся желчь не может выйти из клеток в протоки, что вызывает перерастяжение их оболочек, нарушение обменных процессов. Результатом длительных застойных процессов является гибель гепатоцитов. Встречается при закупорке камнями (механической желтухе), густой желчи, гепатитах, билиарном циррозе печени.
Дистрофия и фиброз
На фоне воспаления (инфекционного или аутоиммунного) функционирующая ткань постепенно замещается соединительнотканной. При дистрофии преобладает нарушение тканевого обмена веществ. Часто эти два состояния сочетаются. АЛТ и АСТ повышены при жировом перерождении печени (жировой гепатоз, стеатоз), болезни Вильсона-Коновалова (накопление ионов меди в клетках), гемохроматозе.
Опухоли
Атипичные клетки могут быть локализованы в ткани самой печени или занесены из других органов с током лимфы или крови. Повышение ферментов отмечается и при первичном раке печени, и метастазировании новообразований.
Паразитарные поражения
Перекрывать пути выведения желчи и провоцировать воспаления могут такие микроорганизмы:
- эхинококк,
- лямблии,
- аскариды,
- описторхис,
- нематоды,
- трихинеллы,
- токсоплазмы,
- амебы,
- малярийный плазмодий.
Медикаменты
Препараты, повреждающие печень, называются гепатотоксичными. К ним могут быть отнесены следующие лекарственные средства:
- антибиотики – Эритромицин, Тетрациклин, Сумамед, Гентамицин и их групповые аналоги;
- анаболические стероиды – Даназол, Нандролон, Сустанон;
- противовоспалительные – Аспирин, Парацетамол, Напроксен, Метиндол;
- ингибиторы моноаминооксидазы – Юмекс, Азилект;
- половые гормоны – тестостерон, прогестерон, эстрогены, противозачаточные таблетки;
- сульфаниламиды – Бисептол, Стрептоцид;
- барбитураты – фенобарбитал (входит в состав Барбовала, Корвалола);
- противоопухолевые – цитостатики, иммунодепрессанты, цитотоксические антибиотики;
- средства для наркоза – Тиопентал натрия, Кетамин, Диприван.
Если препараты с менее токсичным действием применяются длительно, особенно бесконтрольно, пациент одновременно употребляет несколько лекарств, сочетает их с алкогольными напитками, то разрушение печени и повышение трансаминаз в крови выявляют практически в 100% случаев.
Внепеченочные факторы
Отклонения от нормы в сторону повышения встречаются при следующих заболеваниях:
- сердечная недостаточность,
- инфаркт миокарда,
- миокардиодистрофия,
- кардиомиопатия,
- шоковое состояние,
- миокардит,
- перикардит,
- обширная травма,
- ожоговая болезнь,
- острый панкреатит,
- панкреонекроз,
- миозит,
- обморожения,
- гнойно-воспалительные процессы,
- почечная недостаточность,
- инфаркт легкого,
- гемолитическая анемия,
- гипотиреоз,
- вирусные инфекции,
- тромбоэмболия легочной артерии.
Причинами понижения активности аминотрансфераз являются обширный некроз или цирроз печени.
Они сопровождаются массивной гибелью клеток и замещением функционирующей ткани фиброзными волокнами, неспособными к выработке ферментов.
При недостатке витамина В6 нарушается работа трансфераз, так как он используется в реакциях переноса частей аминокислот, поэтому активность АСТ и АЛТ снижается. Низкие показатели бывают и у недоношенных младенцев.
Всегда и надо переживать, если выявлено повышение
Незначительные повышения трансаминаз крови могут вызывать:
- тяжелая физическая нагрузка с повреждением мышечной ткани;
- неоднократные внутримышечные инъекции;
- применение биологически активных добавок, энергетиков, медикаментов;
- спиртные напитки, принятые менее чем за 5 дней до диагностики;
- стиль питания, в котором преобладает фаст-фуд, снеки, сладкие газированные напитки, полуфабрикаты, продукты с консервантами и красителями.
Отличительной особенностью такого изменения показателей является обратимость нарушений. В таких случаях необходимо устранить повреждающий фактор и провести повторный анализ. Следует учитывать, что подобные состояния не являются безобидными, если не изменить образ жизни и не снизить нагрузку на печень, то разрушение клеток приведет к заболеванию.
Другие симптомы повышения трансаминаз
Так как большое количество заболеваний вызывает изменение АСТ и АЛТ крови, то при постановке диагноза учитывают симптомы, сопровождающие поражение печени:
- общая слабость, низкая работоспособность, хроническая усталость;
- тошнота и позывы на рвоту, не связанные с приемом пищи;
- низкий аппетит или полное его отсутствие;
- внезапная непереносимость отдельных видов пищи, отвращение к еде;
- болезненность, тяжесть, дискомфорт в животе, особенно в области печени;
- вздутие живота;
- появление расширенных вен на передней брюшной стенке;
- желтоватая окраска кожи, слизистых, склер;
- кожный зуд, становится нестерпимым по ночам;
- обесцвечивание кала и темный цвет мочи;
- кровотечения из носа, десен, желудка и кишечника.
При вирусных гепатитах ферменты увеличиваются в крови за 10 — 25 дней до появления развернутой клинической картины.
Как отличить проблемы с печенью от инфаркта
Заболевания сердца могут протекать с поражением печени. Это нередко встречается при сердечной недостаточности. Хотя клиническая картина при инфаркте миокарда и застойном гепатите редко требует дифференциальной диагностики при помощи исследования аминотрансфераз, закономерность изменений все же существует.
В мышечной ткани, в том числе и сердечной мышце, преобладает АСТ, поэтому ее активность преобладает при инфаркте над АЛТ, а коэффициент Ритиса больше 1,3.
Однократное измерение трансаминаз не имеет диагностической ценности. Поэтому его проводят каждые 6 часов на протяжении первых суток для определения расширения зоны некроза миокарда, а также исследуют кровь на кардиоспецифические ферменты. Пиковые значения АСТ регистрируют на 6 — 12 час от начала приступа, а нормы она достигает к 10 — 14 дню.
Лечение отклонений
При вирусных, инфекционных или аутоиммунных поражениях печени назначается комплексная терапия в соответствии с причиной заболевания.
Для того чтобы улучшить показатели анализа при физиологических отклонениях от нормы, рекомендуется:
- ввести в меню не менее 400 г растительной пищи (овощей, фруктов, ягод);
- ежедневно употреблять продукты, богатые витаминами Д и В6 (печень рыбы, творог, яичный желток, морепродукты, цельнозерновые каши, отруби, бобовые, орехи);
- исключить из рациона все жирные мясные и молочные продукты, соленые и острые блюда, кофе, алкоголь;
- восстановить нормальную микрофлору кишечника при помощи регулярного приема свежих кисломолочных напитков без добавок, их нужно готовить самостоятельно при помощи заквасок.
Категорически запрещается пациентам с нарушениями печеночных проб самостоятельный прием медикаментов, в том числе и БАДов, обезболивающих, антибиотиков, витамина А.
Рекомендуем прочитать статью о повышенном билирубине в крови. Из нее вы узнаете о прямом и непрямом билирубине, показаниях к сдаче анализа, норме и причинах изменения показателей, методах лечения.
А здесь подробнее о кислотности крови.
Трансаминазы обнаруживают в крови в повышенной концентрации при заболеваниях с разрушением клеток печени, миокарда, почек, скелетных мышц. Анализ на АЛТ и АСТ входит в биохимический анализ крови и относится к печеночным тестам.
https://www.youtube.com/watch?v=t12K9bwsfAg
Назначается при подозрении на поражение гепатоцитов, застой желчи, опухоли, вирусные гепатиты, цирроз, паразитарные инфекции. Изменение активности ферментов встречается и при внепеченочных патологиях, но преобладает рост АСТ над АЛТ. Нормализовать показатели при функциональных нарушениях помогает правильное питание и осторожное применение медикаментов.
Источник: http://CardioBook.ru/transaminazy-krovi/
Определение активности аминотрансфераз
Аспартатаминотансфераза (АсАТ) и аланинаминотрансфераза (АлАТ) – близкие по действию ферменты, при участии которых в организме человека осуществляется межмолекулярный перенос аминогрупп с аминокислот на кетокислоты. Этот процесс называется переаминированием. Значение переаминирования состоит в синтезе и разрушении отдельных аминокислот в организме.
Аминотрансферазы (АсАТ и АлАТ) являются внутриклеточными ферментами и их содержание в сыворотке крови здоровых людей невелико. Однако при повреждении или разрушении клеток, содержащих АсАТ и АлАТ (клеток печени, мышц сердца, скелетной мускулатуры и почек) происходит дополнительный выброс этих ферментов в кровяное русло, что приводит к повышению их активности в крови.
Максимальное количество АлАТ содержится в печени. При поражении клеток печени вирусами, различными химическими веществами, в т.ч. алкоголем и лекарствами, а также при нарушении оттока желчи из-за сдавливания желчного протока или его закупорке камнями активность АлАТ в крови возрастает.
Поэтому определение активности фермента в сыворотке крови широко используется для диагностики болезней печени. Степень увеличения активности АлАТ, как правило, пропорциональна тяжести заболевания, в острых случаях активность фермента в сыворотке крови может превышать нормальные значения в 5-10 раз.
При инфекционном гепатите повышение активности фермента происходит в очень ранние сроки. С увеличением сроков заболевания активность фермента обычно снижается, но медленно, в течение нескольких месяцев – при легком течении заболевания.
Резкое увеличение активности АлАТ наблюдается и при безжелтушной форме заболевания, поэтому данный тест широко применяется при обследовании лиц, пребывающих в очаге инфекции. Исследование активности АлАТ обязательно для всех доноров крови для исключения хронических заболеваний печени.
Длительно продолжающееся увеличение активности трансаминаз или повышение в поздние сроки заболевания может означать развитие массивного развитие некроза печени. Высокая активность АсАТ, превышающая активность АлАТ, предполагает обширный некроз и плохой прогноз (это происходит за счет митохондриальной АсАТ).
При рецидивах и обострении активность фермента вновь повышается. Активность АсАТ при этом также повышается, но значительно ниже, чем АлАТ. Коэффициент АсАТ/АлАТ < 1. Умеренное повышение активности фермента наблюдается при циррозе печени, хроническом гепатите. Таким образом, определение активности АлАТ имеет значение:
· Для обследования контактных в очаге инфекции;
· Как индикатор остроты и активности патологического процесса в печени;
· Для диагностики и дифференциальной диагностики заболеваний
печени;
· Критерий полноты выздоровления.
Повышение активности аминотрансфераз можно отметить и у здоровых людей, находящихся на диете, богатой белком или содержащей до 30 % сахарозы.
AсАT в большом количестве находится в клетках сердца и печени. При инфаркте миокарда увеличение активности AсАT в крови наблюдается через 6-8 часов с момента приступа, а спустя 24-36 часов она возрастает в 4-5 раз относительно верхнего предельного уровня диапазона нормальных значений.
Снижение активности AсАT до нормальных значений происходит лишь через 3-7 суток. Следует отметить, что повышение активности AсАT в крови наблюдается при формах инфаркта миокарда, которые электрокардиографически выявить невозможно. Сердечная мышца содержит незначительное количество АлАТ.
Поэтому уровень активности АлАТ в сыворотке крови при инфаркте миокарда обычно остается в пределах нормы.
Повышение активности AсАT в крови (также как АлАТ) происходит при многих заболеваниях печени. Однако соотношение между увеличением активностей AсАT и АлАТ при разных заболеваниях отличается, поэтому их параллельный анализ дает дополнительную информацию, используемую для постановки точного диагноза.
Снижение активности AсАT и AлАT ниже нормы встречается только при тяжёлых поражениях печени, когда значительно уменьшается количество клеток, синтезирующих эти ферменты (обширный некроз, цирроз).
Существующие методы определения активности аминотрансфераз в сыворотке крови можно разделить на две основные группы:
1. колориметрические (с остановкой реакции) и метод конечной точки
2. кинетические.
Колориметрический метод Райтмана-Френкеля (основан на образовании пируват-2,4-динитрофенилгидразона), несмотря на присущие ему недостатки, продолжает оставаться распространённым в клинико-диагностической практике. К основным недостаткам данного метода можно отнести:
1. невозможность контроля линейности реакции;
2. накопление в реакции оксалоацетата, ингибирующего аминотрансферазы;
3. необходимость построения калибровочного графика;
4. резкое увеличение адсорбции при высокой активности ферментов, затрудняющее учёт результатов;
5. длительность исполнения анализа и некоторые другие.
Принцип метода:
В результате переаминирования, происходящего под действием АлАТ и АсАТ, образуются ПВК и ЩУК. ЩУК способна в процессе ферментативной реакции превращаться в ПВК. При добавлении 2,4 динитрофенилгидрозина образуется гидразон ПВК. Гидразон ПВК в щелочной среде дает окрашивание, интенсивность которого пропорциональна количеству образовавшейся ПВК.
Норма:
АлАТ -0,1 – 0,68 ммоль ПВК \л.ч
АсАТ – 0,1 – 0,45 ммоль ПВК \ л.ч
Кинетические методы.
Преимущество кинетического метода состоит в возможности прямого непрерывного спектрофотометрического измерения скорости ферментативной реакции в начальной линейной части кинетической кривой; оксалоацетат удаляется по мере его образования; для расчёта активности ферментов не требуется построения калибровочного графика. Этот современный метод является высокоспецифичным, быстрым и позволяет получать более точные результаты. Во многих странах он является стандартным, референтным способом определения AсАT и АлАТ.
В основе кинетического метода определения активности аминотрансфераз лежит оптический тест Варбурга. Принцип теста основан на разнице поглощения при длине волны 340 нм восстановленной (НАДН) и окисленной (НАД) форм никотинамидаде-ниндинуклеотида. При 340 нм НАДН имеет максимальную адсорбцию, тогда как НАД при данной длине волны не имеет поглощения.
Для определения активностей аминотрансфераз используют сопряженные ферментативные реакции: основная – реакция переаминирования, катализируемая AсАT или АлАТ, и индикаторная – реакция, протекающая под воздействием вспомогательных, индикаторных ферментов, малатдегидрогеназы (МДГ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ).
Схема определения активности AсАT:
1. Основная реакция:
АсАТ
L-аспартат + α-кетоглутарат оксалоацетат + L-глутамат
2. Индикаторная реакция
МДГ
оксалоацетат + НАДН L-малат + НАД
Схема определения активности АлАТ:
1. Основная реакция
АлАТ
L-аланин + α-кетоглутарат пируват + L-глутамат
2. Индикаторная реакция
ЛДГ
пируват + НАДН L-малат + НАД
В результате окисления НАДН происходит уменьшение оптической плотности при длине волны 340 нм. Снижение оптической плотности отражает активность AсАT и АлАТ. Для расчета активности ферментов используется коэффициент молярной экстинкции НАДН.
Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:
Источник: https://studopedia.ru/15_48749_opredelenie-aktivnosti-aminotransferaz.html
Аминотрансферазы
Аминотрансферазы (трансаминазы) — ферменты, катализирующие межмолекулярный перенос аминогруппы от соответствующих аминокислот на a‑кетокислоты (2‑оксокислоты) с образованием новых кето- и аминокислот без образования свободного аммиака, в качестве кофермента используется витамин В6 (пиридоксин). Эти ферменты играют центральную роль в обмене белков, осуществляя окислительное дезаминирование аминокислот опосредованно через глутаминовую кислоту. Образующаяся глутаминовая кислота дезаминируется глутаматдегидрогеназой с освобождением свободного аммиака и 2‑оксоглутаровой кислоты.
В организме человека наибольшее значение имеют две аминотрансферазы: аспартатаминотрансфераза (АСТ или АсАТ) (L‑аспартат:2‑оксоглутарат-аминотрансфераза, КФ 2.6.1.1.) и аланинаминотрансфераза (АЛТ или АлАТ), (L‑аланин:2‑оксоглутарат-аминотрансфераза, КФ 2.6.1.2.).
В клинической практике чаще всего определяют именно активность этих двух ферментов. Существует также другое название указанных ферментов: для АСТ — глутаматоксалоацетатаминотрансфераза (ГОАТ), для АЛТ — глутаматпируватаминотрансфераза (ГПАТ).
Ниже приведены реакции, катализируемые этими ферментами:
2-Оксоглутарат + Аспартат ↔ Глутамат + Оксалоацетат
2-Оксоглутарат + Аланин ↔ Глутамат + Пируват
Наибольшая активность АСТ обнаружена в миокарде, затем в порядке убывания в печени, скелетных мышцах, головном мозге, почках. Активность фермента в миокарде в 10000 раз выше, чем в сыворотке крови.
Фермент является димером, имеет изоферменты: положительно заряженный митохондриальный с ММ=93 кД и отрицательно заряженный цитозольный с ММ=92 кД. Активность АЛТ максимальна в печени, среди других органов убывает в последовательности: поджелудочная железа, сердце, скелетные мышцы, селезенка, легкие.
Фермент также имеет цитозольный и митохондриальный изоферменты, однако последний содержится в минимальном количестве и нестабилен. Избирательная тканевая локализация позволяет считать трансаминазы маркерными ферментами: АСТ для миокарда, АЛТ для печени.
Соотношение активности аминотрансфераз позволяет судить о глубине повреждения клеток: АЛТ преимущественно локализована в цитоплазме, АСТ — в цитоплазме и в митохондриях.
Существующие методы определения активности трансаминаз в сыворотке крови можно разделить на две основные группы: колориметрические и спектрофотометрические:
1. В основе спектрофотометрических методов лежит использование оптического теста Варбурга (см выше). Эти методы являются наиболее специфичными и точными для исследования активности трансаминаз сыворотки крови, основаны на различии поглощения окисленной и восстановленной форм НАД при 340 нм и требуют постановки индикаторных реакций, в которые вовлекаются продукты основной реакции:
Оксалоацетат + НАДH ↔ Малат + НАД
Пируват + НАДH ↔ Лактат + НАД
Активность ферментов в данном случае будет выражаться в нмоль НАДH/с×л.
Нормальные величины
Сыворотка | АЛТ | 30‑420 нмоль/с·л или 2‑25 МЕ |
АСТ | 30‑340 нмоль/с·л или 2‑20 МЕ | |
Коэффициент де Ритиса (АСТ / АЛТ) | 1,33±0,40 |
2. Группа колориметрических методов:
- основанные на образовании окрашенного динитрофенилгидразона пировиноградной кислоты. Наибольшее применение нашел метод Райтмана‑Френкеля, являющийся технически простым и дающим воспроизводимые результаты.
- азометоды, основанные на образовании цветного соединения между щавелевоуксусной кислотой и 6‑бензамидо-4‑метокситолуидиндиазониевым хлоридом. Эти методы используются для определения активности АСТ, просты в исполнении, но требуют редких реактивов.
Унифицированными методами определения активности этих ферментов являются непрямой оптический тест Варбурга по накоплению НAДH и колориметрический метод Райтмана‑Френкеля.
Принцип
Основан на образовании в щелочной среде окрашенного комплекса 2,4‑динитрофенилгидразина с оксалоацетатом и пируватом. Активность ферментов выражают в микромолях пирувата, т.к. оксалоацетат спонтанно декарбоксилируется до пирувата.
Влияющие факторы
Аспирин, барбитураты, пенициллин, опиаты, прием пиридоксальфосфата, внутримышечные инъекции завышают результаты исследования. Необходимо избегать гемолиза, так как в эритроцитах активность фермента в 6 раз выше, чем в сыворотке.
Клинико‑диагностическое значение
Определение активности АСТ и АЛТ является чувствительным тестом для диагностики инфаркта миокарда, который не выявляется на ЭКГ, активность АСТ возрастает через 4‑6 часов от начала ангинального приступа, спустя 24‑36 часов достигает максимума и нормализуется на 3‑7 день. Вторичное повышение свидетельствует о повторном инфаркте. Величина активации фермента зависит от обширности поражения миокарда: в тяжелых случаях установлено 20‑кратное повышение активности АСТ и 10‑кратная активация АЛТ.
Особенно важное значение имеет определение активности аминотрансфераз для диагностики заболеваний печени.
Некроз или повреждение печеночных клеток любой этиологии (острый и обострения хронического гепатита, холестатическая и обтурационная желтуха, лекарственно-индуцированное поражение) сопровождаются повышением активности обоих ферментов, преимущественно АЛТ, коэффициент де Ритиса = АСТ/АЛТ < 1,33.
Уже в продромальном периоде болезни Боткина и у больных с безжелтушной формой гепатита активность АЛТ достоверно возрастает. Выявлены случаи, когда активность АЛТ составила 64 ммоль/ч·л, а АСТ — 27 ммоль/ч·л.
Менее высокое увеличение активности отмечено при циррозе печени, травме скелетных мышц, миозите, миопатиях, тепловом ударе, миокардите, некоторых опухолях печени, гемолитических болезнях.
Источник: https://biokhimija.ru/enzymes/aminotransferase.html
Определение трансаминаз в сыворотке крови. Принцип метода, диагностическое значение
Общая схема источников и путей расходования аминокислот в тканях. Экзогенный и эндогенный пул аминокислот
Фонд свободных аминокислот организма составляет примерно 35 г. свободных аминокислот в крови в среднем равно 35-65 мг/дл. Большая часть аминокислот входит в состав белков, количество которых в организме взрослого человека нормального телосложения составляет примерно 15 кг.
Источники свободных аминокислот в клетках – белки пищи, собственные белки тканей и синтез аминокислот из углеводов.
Многие клетки, за исключением высокоспециализированных (например, эритроцитов), используют аминокислоты для синтеза белков, а также большого количества других веществ: фосфолипидов мембран, гема, пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов, биогенных аминов (катехоламинов, гистамина) и других соединений.
Какой-либо специальной формы депонирования аминокислот, подобно глюкозе или жирных кислот, не существует. Поэтому резервом аминокислот могут служить все функциональные и структурные белки тканей, но преимущественно белки мышц, поскольку их больше, чем всех остальных.
В организме человека в сутки распадается на аминокислоты около 400 г белков, примерно такое же количество синтезируется. Поэтому тканевые белки не могут восполнять затраты аминокислот при их катаболизме и использовании на синтез других веществ.
Первичными источниками аминокислот не могут служить и углеводы, так как из них синтезируются только углеродная часть молекулы большинства аминокислот, а аминогруппа поступает от других аминокислот.
Следовательно, основным источником аминокислот организма служат белки пищи.
Общие пути катаболизма аминокислот в тканях.
Общие пути превращения аминокислот включает реакции дезаминирования, трансаминирования и декарбоксилирования.
Трансаминирование, химизм. Трансаминазы, их специфичность. Роль витамина В6 в трансаминировании. Биологическая роль реакций транс- аминирования.
Трансаминирование есть подразумевают реакции межмолекулярного переноса аминогруппы от аминокислоты на альфа-кетокислоту без промежуточного образования аммиака.
Реакция трансаминирования являются обратимыми и универсальными для всех жиых организмо. Эти реакции протекают при участии специфических ферментов, аминотрансферазы или трансаминазы.
Аминотрансферазы обладают субстратной специфичностью к разным аминокислотам. В тканях человека более 10 разных аминотрансфераз. Топовые ферменты. – аланиаминотрансфераза (АЛТ); – глутамат-пируватаминотрансфераза (ГПТ); – аспартатаминотрансфераза (АСТ);
– по обратной реакции глутама-оксалоацетатаминотрансфераза (ГОТ).
В переносе аминогруппы активное участие принимает кофермент трансаминаз пиридоксальфосфат, производное витамина В6, который процессе реакции обратимо превращается в пиридоксаминфосфат.
Биологическая роль – ОЧЕНЬ важная. Трансаминирование есть заключительный этап синтеза заменимых аминокислот из соответствующих альфа-кетокислот, если они НУЖНЫ, НЕОБХОДИМЫ клеткам в данных момент. Также трансаминирование это первая стадия дезаминирования большинства аминокислот, т.е. начальный этап их катаболизма. Общее число аминокислот в лектке не меняется.
Определение трансаминаз в сыворотке крови. Принцип метода, диагностическое значение.
Ладно, это есть в методичке, но краткий пересказ предыдущих эпизодов.
Аминотрансферазы – ферменты, катализирующие межмолекулярный перенос аминогруппы с аминокислоты на кетокислоту. Наибольшее значение имеет определение активности 2-х ферментов: аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ). Их много, они везде.
Всего капитально два метода: 1. С использованием стандартных реактивов. В результате реакции пировиноградной кислоты получается… субстанция коричневого-фиолетового цвета. 2. Унифицированный метод.
– Определение активности аспартатаминотрансферазы. Основан на определении скорости образования НАД за счет окисления НАД+Н. В результате реакции уменьшается оптическая плотность растора.
– Определение активности аспартатаминотрансферазы.
Основан на определении скорости образования НАД за счет окисления НАД+Н. В результате реакции уменьшается оптическая плотность растора.
Диагностическое значение: Определение активности АсАТ и АлАТ широко используется для диагностики болезней печени и заболеваний сердца. Актиность АлАТ увеличивается при обострении хронического гепатита, при токсическом поражение сердца.
Активность АсАТ возрастанет при гипертонических кризах, инфарктах.
Дата добавления: 2018-05-02; просмотров: 2156;
Источник: https://studopedia.net/4_62297_opredelenie-transaminaz-v-sivorotke-krovi-printsip-metoda-diagnosticheskoe-znachenie.html