Определение трансаминаз в сыворотке крови

Аминотрансферазы (трансаминазы) сыворотки

Норма (варьирует в зависимости отметода):

аспартатная трансаминаза (ACT)- 6-25 МЕ/л при 30C),аланиновая трансаминаза (АЛТ) – 3-26 МЕ/лпри 30° С.)

А. Предосторожности.Избегатьгемолиза, быстро отделять сыворотку отсгустка.

Б. Физиологическая основа.

Аспартатнаятранс­аминаза (ACT),аланиновая трансаминаза (АЛТ) илактатдегидрогеназа – это внутриклеточныефермен­ты, участвующие в обменеаминокислот и углево­дов. В высокойконцентрации содержатся в мыш­цах,печени, мозге. Повышение концентрацииэтих ферментов в крови свидетельствуето некрозе или поражении прежде всегоэтих тканей. В. Интерпретация.

1.

Повышениепоказателя имеет место при инфар­ктемиокарда (особенноACT);при остром инфек­ционном гепатите(АЛТ обычно повышена больше, чемACT);циррозе печени (ACTповышенаболь­ше, чем АЛТ); при метастазах впечень или пер­вичной опухоли печени.При поражении опухоле­вым процессомсерозных полостей уровень фермен­товповышается в транссудатах.ACTповышается при мышечной дистрофии,дер-матомиозите и па-роксизмальноймиоглобинурии.

2. Снижениепоказателя имеет место при недоста­точностипиридоксина (витамина В,), часто вре­зультате повторных процедургемодиализа; при по­чечной недостаточности,при беременности.

Аммиак крови

Норма (по методу Конвея): 10-110 мкг% вцельной крови (СИ 12-65 мкмоль/л).

А. Предосторожности.Не использоватьантикоагу­лянты, содержащие аммиак.В качестве антикоагу­лянтов следуетприменять оксалат калия, кальцийдвунатриевуюсоль ЭДТА и гепарин, свободный от аммиака.Определение должно проводитьсянемед­ленно после забора крови или втечение часа, ес­ли образец хранилсяна льду.

Б. Физиологическая основа.

Аммиакпоступает в кровь из двух основныхисточников: 1) большое количество аммиакаосвобождается в толстом ки­шечникепри разложении азотсодержащих веществгнилостными бактериями; 2) аммиаквыделяется в процессе белкового обмена.

Поступающий в ворот­ную систему илив общий кровоток аммиак быст­ропревращается в печени в мочевину.Печеночная недостаточность можетприводить к повышению аммиака в крови,особенно если она сопровожда­етсявысоким потреблением белка или кишечным

кровотечением.

В. Интерпретация.Аммиак повышаетсяв крови при печеночной недостаточностиили при шунти-ровании кровотока в печенивследствие портака-вального анастомоза,особенно нафоневысокого содержаниябелка в пище или при кишечном кро­вотечении.

БЕЛКИ СЫВОРОТКИ ИЛИ ПЛАЗМЫ (В ТОМЧИСЛЕ, ФИБРИНОГЕН)

Норма: см. “Интерпретация”

А. Предосторожности.Нельзяиспользовать сыво­ротку или плазмусо следами гемолиза. Поскольку фибриногенудаляется при свертывании крови,оп­ределение его в сыворотке невозможно.

Б. физиологическая основа.Концентрациябелка определяет коллоидно-осмотическоедавление плаз­мы. На концентрациюбелка в плазме влияют пи­тание, функцияпочек и печени, ряд заболеваний(множественная миелома), метаболическиенаруше­ния. Изменения в соотношениибелковых фракций могут свидетельствоватьоб определенных заболева­ниях.

В. Интерпретация 1. Общий белок сыворотки.Норма: 6-8 г%. (СИ:

60—80г/л). См.ниже”Альбумин и фракции глобулинов” итабл. 4.

Таблица 4. Фракции белков,определяемые при электрофорезе

2.Альбумин сыворотки илиплазмы. Норма:

3,5-5,5 г%(СИ: 33-55г/л):

а) повышениепоказателя имеет местопри дегид­ратации, шоке, гемоконцентрации,внутривенном введении больших количествконцентрированных “растворов”альбумина;

б) снижениепоказателя имеет местопри недоеда­нии, синдроме малабсорбции,остром и хрониче­ском гломерулонефрите,нефрозе, острой и хрони­ческойпеченочной недостаточности, опухолях,лей­козах.

3. Глобулинсывороткиили плазмы. Норма: 2—3,6 г% (СИ: 20-36 г/л) (см.табл. 5 и б):

а) повышениепоказателя имеет местопри болез­нях печени, инфекционномгепатите, циррозе пе­чени, билиарномциррозе, гемохроматозе, систем­нойкрасной волчанке, плазмоклеточноймиеломе, лимфопролиферативныхзаболеваниях, саркоидозе, острых ихронических инфекциях; особенно прилимфогранулеме, обусловленной венерическимзабо­леванием, тифе, лейшманиозе,шистоматозе, маля­рии;

б) снижениепоказателя имеет местопри недоста­точно калорийном питании,врожденной агаммагло-булинемии,приобретенной гипогаммаглобулинемии,лимфолейкозе.

4. фибриногенплазмы. Норма: 0,2-0,6 г%(СИ:2-6г/л:

а)повышение показателя имеет местопри гломерулонефрите, нефрозе (иногда),инфекциях;

б) снижениепоказателя имеет местопри диссеминированном внутрисосудистомсвертывании крови (случаи беременностис отслойкой плаценты, эмбо­лииоколоплодными водами, стремительныероды), при менингококковом менингите,раке простаты с метастазами, лейкозах,при острой и хронической печеночнойнедостаточности, врожденнойфибрино-генопении.

БИКАРБОНАТЫ СЫВОРОТКИ ИЛИ ПЛАЗМЫ

Норма: 24-28 мэкв/л (СИ: 24-28 ммоль/л)2).

А. Предосторожности.Плазма илисыворотка дол­жны быть отделены отклеток крови и храниться в замороженномсостоянии в закрытых пробирках.

Б. Физиологическая основа.

Бикарбонатныйбуфер – одна из важнейших систем,обеспечивающих нормальный рН жидкостейтела. Определение би­карбонатов и рНв артериальной крови – главные показателипри оценке кислотно-щелочного баланса.

В. Интерпретация

I.Повышение показателяимеет место при а) метаболическомалкалозе (рН артериальной крови повышен),обусловленном приемом больших количествбикарбоната натрия, упорной рвотой свыбросом кислого содержимого желудка,а также дефицитом калия;

б) дыхательном ацидозе (рН артериальнойкрови снижен) вследствие неадекватноговыведения СО, (приводящего к повышениюРсо2 ) при эмфиземе легких, уменьшениидиффузии при поражении альвеолярноймембраны, при сердечной недостаточ­ности,сопровождающей легочным застоем илиоте­ком легких, при нарушении вентиляциилегких любой этиологии, включаяпередозировку седатив-ных препаратов,наркотиков, или при неадекват­нойискусственной вентиляции легких.

2. Снижениепоказателя имеет местопри

а) метаболическомацидозе (рНартериальной крови снижен) вследствиедиабетического кетоаци-доза, молочнокислогоацидоза, голодания, упорного поноса,почечной недостаточности, интоксикациисалицилатами;

б)респираторном алкалозе (рНартериальной кро­ви повышен) вследствиегипервентиляции (сниже­но Рсо2).

БИЛИРУБИН СЫВОРОТКИ

Норма: общий 0,2-1,2 мг% (СИ: 3,5-19 мкмоль/л).Прямой (глюкуронид) – 0,1-0,5 мг%. Непрямой(несвязанный) – 0,1-0,7 мг% (СИ: пря­мой до7 мкмоль/л, непрямой до 12 мкмоль/л).

А. Предосторожности.Необходимобрать кровь на­тощак во избежаниемутности сыворотки. Для ста­бильностисыворотки ее образцы должны хранить­сяв замороженном виде в темноте.

Б. Физиологическая основа.

Прираспаде гемогло­бина образуетсябилирубин. В печени он связыва­етсяс глюкуронатом и в виде диглюкуронидаэкс-кретируется с желчью. Билирубиннакапливается в плазме при печеночнойнедостаточности, закупорке желчевыводящихпутей, при повышенном распаде гемоглобина.Изменение концентрации может бытьсвязано также с дефектом ферментныхсистем,

участвующих в метаболизме билирубина(напри­мер, при отсутствииглюкуронилтрансферазы).

В. Интерпретация.

1.

Прямой инепрямойбилирубин сыворотки по­вышены приостром или хроническом гепатите,за­купорке желчевыводящих путей (науровне желч­ных протоков или общегожелчного протока), при токсическойреакции на многие лекарственныепрепараты, химические вещества, токсины,при синдромах Дабин-Джонсона и Ротора.

2. Непрямойбилирубинсыворотки повышен при гемолитическиханемиях, других гемолитических реакциях,при отсутствии или дефицитеглюкуро­нилтрансферазы (например,при синдромах Жиль-бера и Криглера-Наджара).

3. Прямой иобщийбилирубин могут быть значи­тельноповышены у здоровых людей после 24-48 чголодания (иногда даже после 12 ч), придлитель­ной низкокалорийной диете.

7-ГЛУТАМИЛТРАНСПЕПТИДАЗА, ИЛИТРАНСФЕРАЗА, СЫВОРОТКИ

Норма: мужчины – менее 30 мЕД/мл при 30 °С, женщины

Источник: https://studfile.net/preview/535501/page:2/

Что показывают трансаминазы крови

Трансаминазы – это белковые молекулы, переносящие азот и водород. Они осуществляют связь между углеводным и белковым обменом. В норме находятся внутри клетки. Повышенный уровень трансаминаз в крови отражает разрушение тканей: сердечной, печени, поджелудочной железы и почек.

Подробнее о показаниях к исследованию, причинах возрастания уровня АСТ и АЛТ, а так же как можно при помощи их соотношения выявить болезни печени или инфаркт, читайте в этой статье.

Когда необходимо определение трансаминаз у взрослых и детей

Аминотрансферазы (трансаминазы, АЛТ и АСТ) в организме отвечают за целостность клеток.

Если происходит повреждение тканей, то они выходят в кровь, что дает возможность исследовать их активность. Самая большая концентрация этих ферментов обнаруживается в печени.

Поэтому большинство показаний связано с подозрениями на нарушение ее функции: слабость, пожелтение кожи, изменение цвета мочи и кала.

Проведение анализа необходимо при заболеваниях печени иммунного, инфекционного или токсического происхождения, приеме препаратов с негативным влиянием на печень, алкоголя. Его рекомендуют донорам и людям, которые отнесены к группам риска:

• были в контакте с больным вирусным гепатитом;
• имеют генетическую предрасположенность к печеночной патологии;
• болеют сахарный диабетом;
• страдают ожирением.

Исследование трансаминаз используется в процессе лечения пациентов с опухолевыми заболеваниями внутренних органов, циррозом и раком, жировым перерождением печени. Результаты диагностики могут быть использованы в комплексе с другими лабораторными тестами и для обследования пациентов с сердечной, мышечной болью, нарушением ритма сердца, отеками, одышкой, острой болью в животе.

аминотрансфераз в крови не может применяться для оценки степени тяжести болезни, так как их активность не связана с глубиной и обширностью разрушения тканей. Исследование АСТ и АЛТ обычно проводится вместе с анализами крови на билирубин, щелочную фосфатазу, креатинфосфокиназу, миоглобин, гаммаглутаминтрансфераза и лактатдегидрогеназу.

В детской практике изменения АЛТ и АСТ обычно связаны с инфицированием вирусом гепатита и медикаментозным поражением печени. Одно из опасных состояний – синдром Рея. Он возникает при лечении вирусных заболеваний аспирином и проявляется острой печеночной недостаточностью, энцефалопатией.

Рекомендуем прочитать статью о тромбоцитопении. Из нее вы узнаете о причинах появления и симптомах заболевания у взрослых и детей, диагностике состояния, лечении и последствиях для больного.

А здесь подробнее о тимоловой пробе.

Подготовка к анализу

Для исследования нужно взять кровь из вены, капиллярная кровь используется редко. Диагностика происходит строго натощак в утреннее время. В исключительных случаях врач может назначить анализ днем, после четырехчасового перерыва в приеме пищи. При плановом обследовании обязательно проводится предварительная подготовка:

• за 3 — 5 дней требуется отменить ряд медикаментов, которые могут изменить результаты анализа крови. Для этого врач вносит коррективы в терапию или при невозможности отмены в лабораторию больной предоставляет список препаратов, принятых накануне;
• за сутки из рациона нужно исключить жирную и острую пищу, алкоголь;
• последний прием пищи вечером до анализа должен быть легким;
• воздерживаться от еды надо не менее 8 и не больше 12 часов, в это время разрешена только питьевая вода;
• за полчаса до исследования крови не рекомендуются физические или эмоциональные нагрузки, запрещается курение.

Анализ крови из вены

Норма трансаминаз в сыворотке крови

Уровень ферментов измеряется в единицах на литр. Показатели нормы меняются с возрастом, отличаются по половому признаку. В период беременности бывает небольшое снижение АЛТ.

Нужно учитывать, что существует несколько методик измерения концентрации трансфераз в сыворотке крови, поэтому референсные (средние физиологические) значения для каждой лаборатории разные. По этой же причине, если больному рекомендуется повторное исследование, то его лучше проходить в том же учреждении, что и первичное.

Нормы аланиновой и аспарагиновой трансферазы (метод УФ кинетического теста)

Не всегда требуется знать только абсолютные значения этих показателей. Итальянский ученый Фернандо де Ритис предложил использовать коэффициент для диагностики болезней, который назвали в его честь. Он применим только при обнаружении повышенных значений.

Если соотношение АСТ/АЛТ меньше одного, то это признак вирусного гепатита, а при превышении единицы – хронических и дистрофических поражений печеночной ткани. У алкоголиков он больше 2.

Смотрите на видео об анализе крови АЛТ и АСТ:

Почему уровень показателей может быть повышен

Активность АЛТ и АСТ является маркером повреждения печени, а также дополнительным показателем при диагностике инфаркта.

При трактовке результатов анализа учитывают отклонения от нормы не только показателей трансфераз, но и других печеночных проб, данные врачебного обследования и методов инструментальной диагностики. Все причины изменений можно разделить на несколько групп.

Разрушены клетки печени

Некроз гепатоцитов – это необратимое повреждение ткани, при котором отмечается самое большое повышение активности ферментов. Его причинами может быть вирусное, токсическое, медикаментозное или алкогольное разрушение клеток, аутоиммунные воспалительные процессы, а также острая ишемия при нарушении притока крови к органу.

Застой желчи

Внутрипеченочный холестаз приводит к тому, что образующаяся желчь не может выйти из клеток в протоки, что вызывает перерастяжение их оболочек, нарушение обменных процессов. Результатом длительных застойных процессов является гибель гепатоцитов. Встречается при закупорке камнями (механической желтухе), густой желчи, гепатитах, билиарном циррозе печени.

Дистрофия и фиброз

На фоне воспаления (инфекционного или аутоиммунного) функционирующая ткань постепенно замещается соединительнотканной. При дистрофии преобладает нарушение тканевого обмена веществ. Часто эти два состояния сочетаются. АЛТ и АСТ повышены при жировом перерождении печени (жировой гепатоз, стеатоз), болезни Вильсона-Коновалова (накопление ионов меди в клетках), гемохроматозе.

Опухоли

Атипичные клетки могут быть локализованы в ткани самой печени или занесены из других органов с током лимфы или крови. Повышение ферментов отмечается и при первичном раке печени, и метастазировании новообразований.

Паразитарные поражения

Перекрывать пути выведения желчи и провоцировать воспаления могут такие микроорганизмы:

• эхинококк,
• лямблии,
• аскариды,
• описторхис,
• нематоды,
• трихинеллы,
• токсоплазмы,
• амебы,
• малярийный плазмодий.

Медикаменты

Препараты, повреждающие печень, называются гепатотоксичными. К ним могут быть отнесены следующие лекарственные средства:

• антибиотики – Эритромицин, Тетрациклин, Сумамед, Гентамицин и их групповые аналоги;
• анаболические стероиды – Даназол, Нандролон, Сустанон;
• противовоспалительные – Аспирин, Парацетамол, Напроксен, Метиндол;
• ингибиторы моноаминооксидазы – Юмекс, Азилект;
• половые гормоны – тестостерон, прогестерон, эстрогены, противозачаточные таблетки;
• сульфаниламиды – Бисептол, Стрептоцид;
• барбитураты – фенобарбитал (входит в состав Барбовала, Корвалола);
• противоопухолевые – цитостатики, иммунодепрессанты, цитотоксические антибиотики;
• средства для наркоза – Тиопентал натрия, Кетамин, Диприван.

Если препараты с менее токсичным действием применяются длительно, особенно бесконтрольно, пациент одновременно употребляет несколько лекарств, сочетает их с алкогольными напитками, то разрушение печени и повышение трансаминаз в крови выявляют практически в 100% случаев.

Внепеченочные факторы

Отклонения от нормы в сторону повышения встречаются при следующих заболеваниях:

• сердечная недостаточность,
• инфаркт миокарда,
• миокардиодистрофия,
• кардиомиопатия,
• шоковое состояние,
• миокардит,
• перикардит,
• обширная травма,
• ожоговая болезнь,
• острый панкреатит,
• панкреонекроз,
• миозит,
• обморожения,
• гнойно-воспалительные процессы,
• почечная недостаточность,
• инфаркт легкого,
• гемолитическая анемия,
• гипотиреоз,
• вирусные инфекции,
• тромбоэмболия легочной артерии.

Причинами понижения активности аминотрансфераз являются обширный некроз или цирроз печени.

Они сопровождаются массивной гибелью клеток и замещением функционирующей ткани фиброзными волокнами, неспособными к выработке ферментов.

При недостатке витамина В6 нарушается работа трансфераз, так как он используется в реакциях переноса частей аминокислот, поэтому активность АСТ и АЛТ снижается. Низкие показатели бывают и у недоношенных младенцев.

Всегда и надо переживать, если выявлено повышение

Незначительные повышения трансаминаз крови могут вызывать:

• тяжелая физическая нагрузка с повреждением мышечной ткани;
• неоднократные внутримышечные инъекции;
• применение биологически активных добавок, энергетиков, медикаментов;
• спиртные напитки, принятые менее чем за 5 дней до диагностики;
• стиль питания, в котором преобладает фаст-фуд, снеки, сладкие газированные напитки, полуфабрикаты, продукты с консервантами и красителями.

Отличительной особенностью такого изменения показателей является обратимость нарушений. В таких случаях необходимо устранить повреждающий фактор и провести повторный анализ. Следует учитывать, что подобные состояния не являются безобидными, если не изменить образ жизни и не снизить нагрузку на печень, то разрушение клеток приведет к заболеванию.

Другие симптомы повышения трансаминаз

Так как большое количество заболеваний вызывает изменение АСТ и АЛТ крови, то при постановке диагноза учитывают симптомы, сопровождающие поражение печени:

• общая слабость, низкая работоспособность, хроническая усталость;
• тошнота и позывы на рвоту, не связанные с приемом пищи;
• низкий аппетит или полное его отсутствие;
• внезапная непереносимость отдельных видов пищи, отвращение к еде;
• болезненность, тяжесть, дискомфорт в животе, особенно в области печени;
• вздутие живота;
• появление расширенных вен на передней брюшной стенке;
• желтоватая окраска кожи, слизистых, склер;
• кожный зуд, становится нестерпимым по ночам;
• обесцвечивание кала и темный цвет мочи;
• кровотечения из носа, десен, желудка и кишечника.

При вирусных гепатитах ферменты увеличиваются в крови за 10 — 25 дней до появления развернутой клинической картины.

Как отличить проблемы с печенью от инфаркта

Заболевания сердца могут протекать с поражением печени. Это нередко встречается при сердечной недостаточности. Хотя клиническая картина при инфаркте миокарда и застойном гепатите редко требует дифференциальной диагностики при помощи исследования аминотрансфераз, закономерность изменений все же существует.

В мышечной ткани, в том числе и сердечной мышце, преобладает АСТ, поэтому ее активность преобладает при инфаркте над АЛТ, а коэффициент Ритиса больше 1,3.

Однократное измерение трансаминаз не имеет диагностической ценности. Поэтому его проводят каждые 6 часов на протяжении первых суток для определения расширения зоны некроза миокарда, а также исследуют кровь на кардиоспецифические ферменты. Пиковые значения АСТ регистрируют на 6 — 12 час от начала приступа, а нормы она достигает к 10 — 14 дню.

Лечение отклонений

При вирусных, инфекционных или аутоиммунных поражениях печени назначается комплексная терапия в соответствии с причиной заболевания.

Для того чтобы улучшить показатели анализа при физиологических отклонениях от нормы, рекомендуется:

• ввести в меню не менее 400 г растительной пищи (овощей, фруктов, ягод);
• ежедневно употреблять продукты, богатые витаминами Д и В6 (печень рыбы, творог, яичный желток, морепродукты, цельнозерновые каши, отруби, бобовые, орехи);
• исключить из рациона все жирные мясные и молочные продукты, соленые и острые блюда, кофе, алкоголь;
• восстановить нормальную микрофлору кишечника при помощи регулярного приема свежих кисломолочных напитков без добавок, их нужно готовить самостоятельно при помощи заквасок.

Категорически запрещается пациентам с нарушениями печеночных проб самостоятельный прием медикаментов, в том числе и БАДов, обезболивающих, антибиотиков, витамина А.

Рекомендуем прочитать статью о повышенном билирубине в крови. Из нее вы узнаете о прямом и непрямом билирубине, показаниях к сдаче анализа, норме и причинах изменения показателей, методах лечения. 

А здесь подробнее о кислотности крови.

Трансаминазы обнаруживают в крови в повышенной концентрации при заболеваниях с разрушением клеток печени, миокарда, почек, скелетных мышц. Анализ на АЛТ и АСТ входит в биохимический анализ крови и относится к печеночным тестам.

https://www.youtube.com/watch?v=t12K9bwsfAg

Назначается при подозрении на поражение гепатоцитов, застой желчи, опухоли, вирусные гепатиты, цирроз, паразитарные инфекции. Изменение активности ферментов встречается и при внепеченочных патологиях, но преобладает рост АСТ над АЛТ. Нормализовать показатели при функциональных нарушениях помогает правильное питание и осторожное применение медикаментов.

Источник: http://CardioBook.ru/transaminazy-krovi/

Определение активности аминотрансфераз

Аспартатаминотансфераза (АсАТ) и аланинаминотрансфераза (АлАТ) – близкие по действию ферменты, при участии которых в организме человека осуществляется межмолекулярный перенос аминогрупп с аминокислот на кетокислоты. Этот процесс называется переаминированием. Значение переаминирования состоит в синтезе и разрушении отдельных аминокислот в организме.

Аминотрансферазы (АсАТ и АлАТ) являются внутриклеточными ферментами и их содержание в сыворотке крови здоровых людей невелико. Однако при повреждении или разрушении клеток, содержащих АсАТ и АлАТ (клеток печени, мышц сердца, скелетной мускулатуры и почек) происходит дополнительный выброс этих ферментов в кровяное русло, что приводит к повышению их активности в крови.

Максимальное количество АлАТ содержится в печени. При поражении клеток печени вирусами, различными химическими веществами, в т.ч. алкоголем и лекарствами, а также при нарушении оттока желчи из-за сдавливания желчного протока или его закупорке камнями активность АлАТ в крови возрастает.

Поэтому определение активности фермента в сыворотке крови широко используется для диагностики болезней печени. Степень увеличения активности АлАТ, как правило, пропорциональна тяжести заболевания, в острых случаях активность фермента в сыворотке крови может превышать нормальные значения в 5-10 раз.

При инфекционном гепатите повышение активности фермента происходит в очень ранние сроки. С увеличением сроков заболевания активность фермента обычно снижается, но медленно, в течение нескольких месяцев – при легком течении заболевания.

Резкое увеличение ак­тивности АлАТ наблюдается и при безжелтушной форме заболевания, поэтому данный тест широко приме­няется при обследовании лиц, пребывающих в очаге инфекции. Исследование активности АлАТ обязательно для всех доноров крови для исключения хронических заболеваний печени.

Длительно продолжающееся увеличение активности трансаминаз или повышение в поздние сроки заболевания может означать развитие массивного развитие некроза печени. Высокая активность АсАТ, превышающая активность АлАТ, предполагает обширный некроз и плохой прогноз (это происходит за счет митохондриальной АсАТ).

При рецидивах и обострении активность фермента вновь повышается. Активность АсАТ при этом также повышается, но значительно ниже, чем АлАТ. Коэффициент АсАТ/АлАТ < 1. Умеренное повышение активности фермента наблюдается при циррозе печени, хроническом гепатите. Таким образом, определение активности АлАТ имеет значение:

· Для обследования контактных в очаге инфекции;

· Как индикатор остроты и активности патологического процесса в печени;

· Для диагностики и дифференциальной диагностики заболеваний
печени;

· Критерий полноты выздоровления.

Повышение активности аминотрансфераз можно отметить и у здоровых людей, находящихся на диете, богатой белком или содержащей до 30 % сахарозы.

AсАT в большом количестве находится в клетках сердца и печени. При инфаркте миокарда увеличение активности AсАT в крови наблюдается через 6-8 часов с момента приступа, а спустя 24-36 часов она возрастает в 4-5 раз относительно верхнего предельного уровня диапазона нормальных значений.

Снижение активности AсАT до нормальных значений происходит лишь через 3-7 суток. Следует отметить, что повышение активности AсАT в крови наблюдается при формах инфаркта миокарда, которые электрокардиографически выявить невозможно. Сердечная мышца содержит незначительное количество АлАТ.

Поэтому уровень активности АлАТ в сыворотке крови при инфаркте миокарда обычно остается в пределах нормы.

Повышение активности AсАT в крови (также как АлАТ) происходит при многих заболеваниях печени. Однако соотношение между увеличением активностей AсАT и АлАТ при разных заболеваниях отличается, поэтому их параллельный анализ дает дополнительную информацию, используемую для постановки точного диагноза.

Снижение активности AсАT и AлАT ниже нормы встречается только при тяжёлых поражениях печени, когда значительно уменьшается количество клеток, синтезирующих эти ферменты (обширный некроз, цирроз).

Существующие методы определения активности аминотрансфераз в сыворотке крови можно разделить на две основные группы:

1. колориметрические (с остановкой реакции) и метод конечной точки

2. кинетические.

Колориметрический метод Райтмана-Френкеля (основан на образовании пируват-2,4-динитрофенилгидразона), несмотря на присущие ему недостатки, продолжает оставаться распространённым в клинико-диагностической практике. К основным недостаткам данного метода можно отнести:

1. невозможность контроля линейности реакции;

2. накопление в реакции оксалоацетата, ингибирующего аминотрансферазы;

3. необходимость построения калибровочного графика;

4. резкое увеличение адсорбции при высокой активности ферментов, затрудняющее учёт результатов;

5. длительность исполнения анализа и некоторые другие.

Принцип метода:

В результате переаминирования, происходящего под действием АлАТ и АсАТ, образуются ПВК и ЩУК. ЩУК способна в процессе ферментативной реакции превращаться в ПВК. При добавлении 2,4 динитрофенилгидрозина образуется гидразон ПВК. Гидразон ПВК в щелочной среде дает окрашивание, интенсивность которого пропорциональна количеству образовавшейся ПВК.

Норма:

АлАТ -0,1 – 0,68 ммоль ПВК \л.ч

АсАТ – 0,1 – 0,45 ммоль ПВК \ л.ч

Кинетические методы.

Преимущество кинетического метода состоит в возможности прямого непрерывного спектрофотометрического измерения скорости ферментативной реакции в начальной линейной части кинетической кривой; оксалоацетат удаляется по мере его образования; для расчёта активности ферментов не требуется построения калибровочного графика. Этот современный метод является высокоспецифичным, быстрым и позволяет получать более точные результаты. Во многих странах он является стандартным, референтным способом определения AсАT и АлАТ.

В основе кинетического метода определения активности аминотрансфераз лежит оптический тест Варбурга. Принцип теста основан на разнице поглощения при длине волны 340 нм восстановленной (НАДН) и окисленной (НАД) форм никотинамидаде-ниндинуклеотида. При 340 нм НАДН имеет максимальную адсорбцию, тогда как НАД при данной длине волны не имеет поглощения.

Для определения активностей аминотрансфераз используют сопряженные ферментативные реакции: основная – реакция переаминирования, катализируемая AсАT или АлАТ, и индикаторная – реакция, протекающая под воздействием вспомогательных, индикаторных ферментов, малатдегидрогеназы (МДГ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ).

Схема определения активности AсАT:

1. Основная реакция:

АсАТ

L-аспартат + α-кетоглутарат оксалоацетат + L-глутамат

2. Индикаторная реакция

МДГ

оксалоацетат + НАДН L-малат + НАД

Схема определения активности АлАТ:

1. Основная реакция

АлАТ

L-аланин + α-кетоглутарат пируват + L-глутамат

2. Индикаторная реакция

ЛДГ

пируват + НАДН L-малат + НАД

В результате окисления НАДН происходит уменьшение оптической плотности при длине волны 340 нм. Снижение оптической плотности отражает активность AсАT и АлАТ. Для расчета активности ферментов используется коэффициент молярной экстинкции НАДН.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Источник: https://studopedia.ru/15_48749_opredelenie-aktivnosti-aminotransferaz.html

Аминотрансферазы

Аминотрансферазы (трансаминазы) — ферменты, катализирующие межмолекулярный перенос аминогруппы от соответствующих аминокислот на a‑кетокислоты (2‑оксокислоты) с образованием новых кето- и аминокислот без образования свободного аммиака, в качестве кофермента используется витамин В6 (пиридоксин). Эти ферменты играют центральную роль в обмене белков, осуществляя окислительное дезаминирование аминокислот опосредованно через глутаминовую кислоту. Образующаяся глутаминовая кислота дезаминируется глутаматдегидрогеназой с освобождением свободного аммиака и 2‑оксоглутаровой кислоты.

В организме человека наибольшее значение имеют две аминотрансферазы: аспартатаминотрансфераза (АСТ или АсАТ) (L‑аспартат:2‑оксоглутарат-амино­трансфераза, КФ 2.6.1.1.) и аланинаминотрансфераза (АЛТ или АлАТ), (L‑аланин:2‑оксоглутарат-аминотрансфераза, КФ 2.6.1.2.).

В клинической практике чаще всего определяют именно активность этих двух ферментов. Существует также другое название указанных ферментов: для АСТ — глутамат­оксалоацетат­амино­трансфераза (ГОАТ), для АЛТ — глутамат­пируват­амино­трансфераза (ГПАТ).

Ниже приведены реакции, катализируемые этими ферментами:

2-Оксоглутарат + Аспартат ↔ Глутамат + Оксалоацетат

2-Оксоглутарат + Аланин ↔ Глутамат + Пируват

Наибольшая активность АСТ обнаружена в миокарде, затем в порядке убывания в печени, скелетных мышцах, головном мозге, почках. Активность фермента в миокарде в 10000 раз выше, чем в сыворотке крови.

Фермент является димером, имеет изоферменты: положительно заряженный митохондриальный с ММ=93 кД и отрицательно заряженный цитозольный с ММ=92 кД. Активность АЛТ максимальна в печени, среди других органов убывает в последовательности: поджелудочная железа, сердце, скелетные мышцы, селезенка, легкие.

Фермент также имеет цитозольный и митохондриальный изоферменты, однако последний содержится в минимальном количестве и нестабилен. Избирательная тканевая локализация позволяет считать трансаминазы маркерными ферментами: АСТ для миокарда, АЛТ для печени.

Соотношение активности аминотрансфераз позволяет судить о глубине повреждения клеток: АЛТ преимущественно локализована в цитоплазме, АСТ — в цитоплазме и в митохондриях.

Существующие методы определения активности трансаминаз в сыворотке крови можно разделить на две основные группы: колориметрические и спектрофотометрические:

1. В основе спектрофотометрических методов лежит использование оптического теста Варбурга (см выше). Эти методы являются наиболее специфичными и точными для исследования активности трансаминаз сыворотки крови, основаны на различии поглощения окисленной и восстановленной форм НАД при 340 нм и требуют постановки индикаторных реакций, в которые вовлекаются продукты основной реакции:

Оксалоацетат + НАДH ↔ Малат + НАД

Пируват + НАДH ↔ Лактат + НАД

Активность ферментов в данном случае будет выражаться в нмоль НАДH/с×л.

Нормальные величины

2. Группа колориметрических методов:

• основанные на образовании окрашенного динитрофенилгидразона пировиноградной кислоты. Наибольшее применение нашел метод Райтмана‑Френкеля, являющийся технически простым и дающим воспроизводимые результаты.
• азометоды, основанные на образовании цветного соединения между щавелевоуксусной кислотой и 6‑бензамидо-4‑метокситолуидин­диазо­ниевым хлоридом. Эти методы используются для определения активности АСТ, просты в исполнении, но требуют редких реактивов.

Унифицированными методами определения активности этих ферментов являются непрямой оптический тест Варбурга по накоплению НAДH и колориметрический метод Райтмана‑Френкеля.

Принцип

Основан на образовании в щелочной среде окрашенного комплекса 2,4‑динитро­фенилгидразина с оксалоацетатом и пируватом. Активность ферментов выражают в микромолях пирувата, т.к. оксалоацетат спонтанно декарбоксилируется до пирувата.

Влияющие факторы

Аспирин, барбитураты, пенициллин, опиаты, прием пиридоксальфосфата, внутримышечные инъекции завышают результаты исследования. Необходимо избегать гемолиза, так как в эритроцитах активность фермента в 6 раз выше, чем в сыворотке.

Клинико‑диагностическое значение

Определение активности АСТ и АЛТ является чувствительным тестом для диагностики инфаркта миокарда, который не выявляется на ЭКГ, активность АСТ возрастает через 4‑6 часов от начала ангинального приступа, спустя 24‑36 часов достигает максимума и нормализуется на 3‑7 день. Вторичное повышение свидетельствует о повторном инфаркте. Величина активации фермента зависит от обширности поражения миокарда: в тяжелых случаях установлено 20‑кратное повышение активности АСТ и 10‑кратная активация АЛТ.

Особенно важное значение имеет определение активности аминотрансфераз для диагностики заболеваний печени.

Некроз или повреждение печеночных клеток любой этиологии (острый и обострения хронического гепатита, холестатическая и обтурационная желтуха, лекарственно-индуцированное поражение) сопровождаются повышением активности обоих ферментов, преимущественно АЛТ, коэффициент де Ритиса = АСТ/АЛТ < 1,33.

Уже в продромальном периоде болезни Боткина и у больных с безжелтушной формой гепатита активность АЛТ достоверно возрастает. Выявлены случаи, когда активность АЛТ составила 64 ммоль/ч·л, а АСТ — 27 ммоль/ч·л.

Менее высокое увеличение активности отмечено при циррозе печени, травме скелетных мышц, миозите, миопатиях, тепловом ударе, миокардите, некоторых опухолях печени, гемолитических болезнях.

Источник: https://biokhimija.ru/enzymes/aminotransferase.html

Определение трансаминаз в сыворотке крови. Принцип метода, диагностическое значение

Общая схема источников и путей расходования аминокислот в тканях. Экзогенный и эндогенный пул аминокислот

Фонд свободных аминокислот организма составляет примерно 35 г. свободных аминокислот в крови в среднем равно 35-65 мг/дл. Большая часть аминокислот входит в состав белков, количество которых в организме взрослого человека нормального телосложения составляет примерно 15 кг.

Источники свободных аминокислот в клетках – белки пищи, собственные белки тканей и синтез аминокислот из углеводов.

Многие клетки, за исключением высокоспециализированных (например, эритроцитов), используют аминокислоты для синтеза белков, а также большого количества других веществ: фосфолипидов мембран, гема, пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов, биогенных аминов (катехоламинов, гистамина) и других соединений.

Какой-либо специальной формы депонирования аминокислот, подобно глюкозе или жирных кислот, не существует. Поэтому резервом аминокислот могут служить все функциональные и структурные белки тканей, но преимущественно белки мышц, поскольку их больше, чем всех остальных.

В организме человека в сутки распадается на аминокислоты около 400 г белков, примерно такое же количество синтезируется. Поэтому тканевые белки не могут восполнять затраты аминокислот при их катаболизме и использовании на синтез других веществ.

Первичными источниками аминокислот не могут служить и углеводы, так как из них синтезируются только углеродная часть молекулы большинства аминокислот, а аминогруппа поступает от других аминокислот.

Следовательно, основным источником аминокислот организма служат белки пищи.

Общие пути катаболизма аминокислот в тканях.

Общие пути превращения аминокислот включает реакции дезаминирования, трансаминирования и декарбоксилирования.

Трансаминирование, химизм. Трансаминазы, их специфичность. Роль витамина В6 в трансаминировании. Биологическая роль реакций транс- аминирования.

Трансаминирование есть подразумевают реакции межмолекулярного переноса аминогруппы от аминокислоты на альфа-кетокислоту без промежуточного образования аммиака.

Реакция трансаминирования являются обратимыми и универсальными для всех жиых организмо. Эти реакции протекают при участии специфических ферментов, аминотрансферазы или трансаминазы.

Аминотрансферазы обладают субстратной специфичностью к разным аминокислотам. В тканях человека более 10 разных аминотрансфераз. Топовые ферменты. – аланиаминотрансфераза (АЛТ); – глутамат-пируватаминотрансфераза (ГПТ); – аспартатаминотрансфераза (АСТ);

– по обратной реакции глутама-оксалоацетатаминотрансфераза (ГОТ).

В переносе аминогруппы активное участие принимает кофермент трансаминаз пиридоксальфосфат, производное витамина В6, который процессе реакции обратимо превращается в пиридоксаминфосфат.

Биологическая роль – ОЧЕНЬ важная. Трансаминирование есть заключительный этап синтеза заменимых аминокислот из соответствующих альфа-кетокислот, если они НУЖНЫ, НЕОБХОДИМЫ клеткам в данных момент. Также трансаминирование это первая стадия дезаминирования большинства аминокислот, т.е. начальный этап их катаболизма. Общее число аминокислот в лектке не меняется.

Определение трансаминаз в сыворотке крови. Принцип метода, диагностическое значение.

Ладно, это есть в методичке, но краткий пересказ предыдущих эпизодов.
Аминотрансферазы – ферменты, катализирующие межмолекулярный перенос аминогруппы с аминокислоты на кетокислоту. Наибольшее значение имеет определение активности 2-х ферментов: аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ). Их много, они везде.

Всего капитально два метода: 1. С использованием стандартных реактивов. В результате реакции пировиноградной кислоты получается… субстанция коричневого-фиолетового цвета. 2. Унифицированный метод.

– Определение активности аспартатаминотрансферазы. Основан на определении скорости образования НАД за счет окисления НАД+Н. В результате реакции уменьшается оптическая плотность растора.

– Определение активности аспартатаминотрансферазы.

Основан на определении скорости образования НАД за счет окисления НАД+Н. В результате реакции уменьшается оптическая плотность растора.

Диагностическое значение: Определение активности АсАТ и АлАТ широко используется для диагностики болезней печени и заболеваний сердца. Актиность АлАТ увеличивается при обострении хронического гепатита, при токсическом поражение сердца.

Активность АсАТ возрастанет при гипертонических кризах, инфарктах.

Дата добавления: 2018-05-02; просмотров: 2156;

Источник: https://studopedia.net/4_62297_opredelenie-transaminaz-v-sivorotke-krovi-printsip-metoda-diagnosticheskoe-znachenie.html